大鼠促黃體激素（LH）ELISA試劑盒的操作步驟詳細介紹
發布時間：2023-01-18 點擊量：4592
大鼠促黃體激素（LH）ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成黃色。顏色的深淺和樣品中呈正相關。用酶標儀測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。
大鼠促黃體激素（LH）ELISA試劑盒的操作步驟：
1、標準品的加樣：設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品；。
2、加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3、加酶：每孔加入酶標試劑，空白孔除外。
4、溫育：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
5、配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
6、洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
7、顯色：每孔先加入顯色劑，再加入顯色劑，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。
8、終止：每孔加終止液，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
9、測定：以空白孔調零，依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
